Survivin启动子的克隆及其在膀胱癌细胞BIU87中的活性鉴定

摘要：

目的 克隆Survivin启动子的有效片段,并检测其在人膀胱癌细胞株BIU87和人正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1中的转录活性.方法 用PCR扩增Survivin基因的启动子片段,克隆入荧光素酶报告质粒pGL3-Basic,构建pGL3BSurvivin重组质粒,用脂质体法瞬时转染BIU87及SV-HUC-1中,检测Survivin启动子在细胞中的转录活性.同时构建含CMV启动子的pGL3BCMV重组质粒作为阳性对照.48h后收集转染细胞与荧光素酶底物反应,检测荧光素酶活性.结果 成功克隆440 bp的Survivin基因启动子,并构建了携带有Survivin基因启动子的pGL3Basic真核表达载体,转染BIU87细胞后的荧光素酶活性为2 286.98±440.21,而SV-HUC-1荧光素酶活性为12.32±1.16,两者差异有统计学意义(P＜0.01).结论 本实验成功克隆的Survivin启动子在BIU87细胞中表现出较高的肿瘤特异性活性,其有可能作为调控元件用于膀胱癌的靶向性基因治疗.

关键词：Survivin、启动子、膀胱肿瘤、基因治疗

所属期刊栏目：23

分类号：R737.14(肿瘤学)

资助基金：浙江省自然科学基金项目Y2090805

在线出版日期：2012-04-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1214-1216,1219