人脐带间充质干细胞源外泌体对高糖环境下RPE细胞自噬和VEGF表达的影响

摘要：

目的:探讨人脐带间充质干细胞(hUMSC)源外泌体对高糖环境下ARPE-19细胞自噬及VEGF表达情况的影响.方法:原代培养hUMSC,分离纯化hUMSC外泌体,Western blot鉴定hUMSC外泌体标志蛋白CD63表达,透射电镜观察外泌体形态.将体外培养的ARPE-19细胞随机分为对照组、高糖组和外泌体+高糖组(75μg/mL外泌体预处理).培养48h后,电镜观察三组细胞内自噬体的超微结构,MTT法检测各组细胞增殖情况,Western blot检测各组细胞中自噬标志性蛋白LC3B、Beclin-1及p62的表达,ELISA法检测细胞上清液中VEGF的质量浓度.结果:分离纯化后的外泌体为直径30～100nm的球状膜性囊泡,表达特异性标识蛋白CD63.外泌体+高糖组中自噬体的数量明显少于高糖组.外泌体+高糖组的细胞增殖率较高糖组明显升高(P<0.01).对照组、高糖组、外泌体+高糖组细胞中LC3B-Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1和p62值分别为(0.214±0.019、0.461±0.067和0.332±0.079),(0.186±0.029、0.615±0.044和0.464±0.046)和(0.771±0.051、0.364±0.016和0.547±0.039).高糖组细胞中LC3B-Ⅱ/Ⅰ值和Beclin-1值均明显高于对照组和外泌体+高糖组(均P<0.05),高糖组细胞中p62值明显低于对照组和外泌体+高糖组(均P<0.01),外泌体+高糖组VEGF的质量浓度较高糖组明显降低(P<0.01).结论:高糖环境激活ARPE-19细胞自噬,并促进其VEGF的表达.hUMSC外泌体可有效抑制高糖环境下ARPE-19细胞自噬水平,并下调VEGF的表达.

关键词：外泌体、间充质干细胞、自噬、高糖、视网膜色素上皮、血管内皮细胞生长因子

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资助基金：陕西省自然科学基础研究计划项目;陕西省教育厅一般专项科学研究计划项目

在线出版日期：2021-05-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：764-769