ILK SiRNA对TGF-β2诱导的人Tenon囊成纤维细胞增殖和凋亡的影响

摘要：

目的:探讨小干扰 RNA(the small interference RNA, SiRNA)沉默整合素链接激酶 (integrin-linked kinase, ILK)基因对转化生长因子-β2(transforming growth factor beta 2,TGF-β2)诱导的人 Tenon 囊成纤维细胞(human Tenon fibroblasts,HTFs)增殖和凋亡的影响.方法:体外培养HTFs细胞,波形蛋白(Vimentin)和角蛋白(keratin)免疫荧光染色进行鉴定.实验分组包括NC组:正常对照HTFs;H+T组:HTFs+5μg/L TGF-β2;H+T+NC SiRNA 组:HTFs+5μg/L TGF-β2+50nmol/L 阴性对照SiRNA;H+T+ILK SiRNA 组:HTFs+5μg/L TGF-β2+50nmol/L ILK SiRNA.50nmol/L ILK SiRNA转染HTFs细胞,5μg/LTGF-β2刺激后,分别利用Western-blot 检测细胞内ILK的蛋白表达,CCK-8检测细胞增殖能力,Hoechst 33342/PI双染检测细胞凋亡.结果:Western-blot结果显示,TGF-β2可以明显上调HTFs细胞内ILK的表达,ILK SiRNA可以明显抑制TGF-β2诱导的ILK蛋白表达(P<0.05).CCK-8检测结果显示, 5μg/L TGF-β2可以促进HTFs细胞增殖,ILK SiRNA转染后48h,细胞的增殖明显受到抑制,且低于正常对照组(P<0.05).Hoechst 33342/PI双染结果显示,TGF-β2并不诱导HTFs细胞发生凋亡(P>0.05),但ILK SiRNA可以诱导HTFs细胞发生明显凋亡,并出现少量坏死细胞(P<0.05).结论:ILK SiRNA可以抑制TGF-β2诱导的HTFs增殖,并诱导HTFs细胞发生凋亡.

关键词：整合素连接激酶、成纤维细胞、转化生长因子-β2、增殖、凋亡

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资助基金：国家自然科学基金项目No.81300765 National Natural Science Foundation of China81300765

在线出版日期：2018-05-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：621-625