重组慢病毒GV303 Rat IL-33体外转染原代大鼠骨髓间充质干细胞的研究

摘要：

目的:探索构建稳定表达IL-33的原代大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)细胞系的方法.方法:体外分离、培养、鉴定大鼠骨髓间充质干细胞,并进行ELISA实验检测转染前IL-33的表达情况.构建GV303 Rat IL-33慢病毒载体,并进行慢病毒的包装.3d后荧光显微镜下观察GFP的表达,分别使用Western blot、ELISA检测转染后的BMSC中IL-33的表达.结果:大鼠BMSC被成功分离并传代,流式细胞术鉴定BMSC可得到CD90、CD29为阳性,CD11b、CD45、CD34为阴性,与之前的文献报道相符.并且BMSC被成功诱导分化为骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞.对转染前的BMSC行ELISA实验检测IL-33的表达,结果为阴性.病毒转染3d后于荧光显微镜下可观察到GFP的表达;ELISA实验检测转染后BMSC中IL-33的表达,结果为阳性;Western blot亦可以检测到IL-33的表达. 结论:应用GV303慢病毒载体可以建立稳定表达IL-33的大鼠BMSC原代细胞系.

关键词：IL-33、转染、骨髓间充质干细胞、实验性自动免疫性葡萄膜炎

所属期刊栏目：17

分类号：S85;R37

资助基金：湖南省自然科学基金12JJ3120;Natural Science Foundation of Hunan Province12JJ3120

在线出版日期：2017-05-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：841-845