10.3980/j.issn.1672-5123.2013.05.03
CoCl2诱导大鼠视网膜前体细胞表达VEGF的研究
目的:探讨氯化钴(CoCl2) 模拟缺氧环境下对大鼠视网膜前体细胞(RPCs)中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF) 基因表达及蛋白分泌的影响.方法:全神经球贴壁法分离、培养、鉴定RPCs.应用RT-PCR及ELISA,检测不同浓度 CoCl2(0,50,100,150,200μmol/L)干预24h后RPCs中VEGF表达的变化,检测150μmol/L CoCl2作用不同时间(0,12,24,36,48,72h)RPCs中VEGF表达的变化.结果:全神经球贴壁法培养的RPCs高表达神经干细胞特异性标记(Nestin),自然分化后表达视网膜细胞标志性抗原Rhodopsine,MAP-2和GFAP,在缺氧培养时间相同的情况下,VEGF 基因的表达随着 CoCl2浓度的增加而逐渐增加而后降低,CoCl2为150μmol/L时达到峰值(P≤0.05).当 CoCl2浓度为150μmol/L培养不同时间时,随着缺氧干预时间的延长,VEGF基因的表达亦是逐渐增加而后降低,于36h时达到峰值(P≤0.05),蛋白与基因表达的变化基本一致.结论:全神经球贴壁法培养RPCs能较好地表达其干细胞特性.CoCl2模拟缺氧环境下,缺氧使 RPCs中VEGF 的分泌增强并具有时间和剂量依赖性.
缺氧、视网膜前体细胞、血管内皮生长因子、CoCl2
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R77;R31
国家自然科学基金面上项目810060080
2013-06-03(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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