无血清器官培养法保存大鼠角膜内皮细胞的活性

摘要：

目的:研究两种新型培养基-内皮细胞培养基(endothelial cell medium,ECM)和无动物成分培养基(animal compound free medium,ACF)在无血清器官培养法保存角膜内皮细胞活性方面的应用效果.方法:将大鼠角膜密闭保存于ECM和ACF培养基中4wk,再经葡聚糖T500脱水2d.以含低浓度牛血清的MEM基础培养基作为对照.计数保存前后角膜内皮细胞密度,检测保存结束大鼠角膜内皮层中胞质紧密粘连蛋白1(zonula occludens-1,ZO-1)的表达水平,评估内皮细胞层的屏障功能.结果:保存结束后,MEM+20mL/L FBS对照组大鼠的角膜内皮细胞密度值最低,ECM+20mL/L FBS组则高达2 250±202个/mm2,ECM和ACF组结果与ECM+20mL/L FBS组接近,细胞死亡率也较低,组间差异有统计学意义(F=28.965,P=0.000).冰冻切片显示ZO-1在保存后大鼠角膜内皮层成功表达.RT-PCR检测表明ZO-1mRNA在各组的表达趋势与内皮细胞密度结果一致(F=592.751,P=0.000).结论:无血清ECM和ACF培养基可以很好地保持器官培养法保存角膜内皮细胞的活性和紧密连接的屏障功能.

关键词：角膜内皮细胞、器官培养法、无血清培养

所属期刊栏目：11

分类号：R77;R33

在线出版日期：2011-06-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：775-778