腺病毒介导脑源性神经营养因子基因在培养的雪旺细胞中的表达

摘要：

目的:观察腺病毒介导人脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)基因在培养的雪旺细胞(Schwann cell, SC)中的表达,为视神经损伤修复提供可靠的组织工程用的种子细胞.方法:在293细胞中培养扩增BDNF重组腺病毒(adenovirall delivered BDNF,Ad-BDNF),采用蚀斑形成试验测定其感染滴度.体外培养SD大鼠源性的SC,以Ad-BDNF感染培养的SC,用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcriptase polymerse chain reaction,RT-PCR)检测BDNF mRNA的表达,用免疫印迹技术(immunoblot assay,Western Blotting)和酶联免疫反应检测(enzyma-linked immumosorbent assay,ELISA)培养液上清中BDNF的表达.结果:Ad-BDNF经扩增后可获得较高感染滴度的重组腺病毒载体.在正常培养条件下未经Ad-BDNF感染的SC低表达BDNF,而感染3d后的SC其BDNF表达明显升高,表达量随时间延长而增加,并能在感染21d后仍维持高表达趋势.结论:Ad-BDNF可以介导BDNF基因转染到培养的SC中,后者可以在较长时间内高效表达BDNF.

关键词：视神经损伤、脑源性神经营养因子、雪旺细胞、重组腺病毒、感染、基因转染

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分类号：R77(眼科学)

资助基金：陕西省自然科学基金2004C2-76;第四军医大学校科研和教改项目XJCX04M004

在线出版日期：2006-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：361-364