家兔角膜内皮细胞的快速培养

摘要：

目的:短期内体外扩增获得角膜内皮细胞.方法:采用揭膜法与消化法相结合获取原代角膜内皮细胞.并采用本实验室自行研制的角膜内皮细胞培养体系,在24孔培养板中分别以1×106,5×105,1×105,5×104,1×104,5×103细胞/孔浓度传代培养细胞,观察细胞的生长情况.结果:以1×105～5×105个细胞/孔浓度的细胞悬液并添加消化后的Descemet膜原代培养细胞,4d后细胞形成与在体细胞相似的密集单层,可以快速获取纯化的角膜内皮细胞.传代培养时,虽然不同接种浓度在4d的细胞增殖倍数差异不显著,但以1×10S～5×105个细胞/孔的浓度传代,3d就可生长成密集单层并可继续传代,现已传至第10代,但传至第4代,细胞形态开始发生改变;而以5×105个细胞/孔以上的浓度传代细胞时,1d的细胞贴壁率下降;以5×104个细胞/孔以下浓度传代,需7d方可长满皿底,并且细胞开始老化,体积变大,不能继续传代培养.或者细胞不能铺满皿底就衰老死亡.结论:本实验的培养体系可在短期内获得实验用角膜内皮细胞.角膜内皮细胞体外培养的增殖能力与其培养浓度和增殖的空间有关,1×105～5×105个细胞/孔的浓度是角膜内皮细胞快速增殖的适宜培养浓度.

关键词：家兔、角膜内皮细胞、体外培养

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分类号：R77(眼科学)

资助基金：国家自然科学基金39970363;国家重点基础研究发展计划973计划G1999054300

在线出版日期：2004-06-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：243-246