兔視網膜色素上皮細胞的培養與保存

摘要：

目的探索一種有效的體外分離兔視網膜色素上皮(RPE)細胞的良好方法,并觀察RPE細胞凍存復蘇前後的形態學特黠.方法用兩步酶法分離兔RPE細胞,第一步酶(透明質酸酶+胰蛋白酶),用于鬆解視網膜神經上皮細胞與RPE細胞之間的連接;第二步(胰蛋白酶)用于離散RPE細胞,制成細胞懸液;然後用慢凍速融方法對細胞進行冷凍保存及復蘇,最後用4種方法(RPE片層觀察、H-E染色、免疫組化法及光、電鏡觀察法)觀察RPE細胞在凍存前後的形態特點.結果用此方法分離培養的細胞其結構完整,純度高,收獲量多,在體外生長旺盛,達到鋪滿匯合的時間縮短,同時維持體内細胞的許多生物學和形態學特點.細胞凍存復蘇後的存活率高達80%左右,且與凍存前細胞形態相比未見明顯差别.結論此分離培養方法及凍存復蘇法是高效可行的.

关键词：RPE細胞、培養、保存、兔、體外

所属期刊栏目：2

分类号：R77(眼科学)

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：21-24