MERS-CoV调控非小细胞肺癌细胞A549补体系统抑制因子C4BPA的机制

摘要：

目的 探讨关于中东呼吸综合征-冠状病毒(middle east respiratory syndrome-coronavirus,MERS-CoV)调控非小细胞肺癌细胞A549补体系统抑制因子补体成分4结合蛋白Alpha(complement component 4 binding protein alpha,C4BPA)的机制.方法 以是否MERS-CoV感染非小细胞肺癌细胞A549分为感染组和对照组,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫印迹和实时荧光定量PCR(qPCR)分别检测2组细胞C4BPA的蛋白和mRNA表达情况.TargetScanHuman预测与C4BPA结合的miRNA,实时荧光定量PCR和荧光素酶报告试验确定靶向C4BPA的miRNA.在MERS-CoV感染的情况下,过表达或敲低靶向C4BPA的miRNA,ELISA或qPCR检测C4BPA的表达和分泌情况.同时分析人肺成纤维细胞和小鼠感染MERS-CoV后,C4BPA和miR-451b的表达情况.结果 非小细胞肺癌细胞A549感染MERS-CoV后,其分泌的C4BPA增加(P＜0.05).通过TargetScanHuman在线分析和qPCR发现MERS-CoV抑制非小细胞肺癌细胞A549 miR-451b的表达(P＜0.05),并且miR-451b靶向C4BPA的3'UTR(P＜0.05).过表达miR-451b后,C4BPA的表达和分泌受到抑制(P＜0.05).敲低miR-451b后,C4BPA的表达和分泌受到促进(P＜0.05).同时,MERS-CoV感染人肺成纤维细胞和小鼠后,miR-451b的表达受到抑制(P＜0.05),C4BPA的表达增强.并且,MERS-CoV感染引起的C4BPA增多能够抑制补体经典系统的溶血活性.结论 MERS-CoV通过下调miR-451b促进C4BPA的分泌.

关键词：MERS-CoV、非小细胞肺癌细胞A549、C4BPA、miR-451b

所属期刊栏目：36

分类号：R392

在线出版日期：2020-10-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：756-762