重组人源化抗人HGF单克隆抗体鉴定及其抗肿瘤活性研究

摘要：

目的 对人源化抗肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)单克隆抗体进行初步鉴定,并对其体内、外抗肿瘤活性及药代动力学特征进行研究.方法 将基因工程技术制备的2株抗HGF人源化单克隆抗体HE19-12和HD19-27,通过UV、SDS-PAGE方法对其质量浓度、相对分子质量及纯度进行鉴定;MTT法评价抗体对人脑胶质瘤U87MG细胞的增殖抑制活性,并比较抗体人源化前后活性差异;采用ELISA法评价抗体结合HGF及竞争抑制HGF与受体结合的能力;Transwell法研究抗体对HGF促进PC-3细胞迁移的抑制能力;通过构建U87MG裸鼠移植瘤模型,比较抗体在体内的抗肿瘤作用;抗体通过静脉给予正常小鼠,分析其药代动力学特征.结果 2株抗体单体纯度均达到90％以上,均可抑制U87MG肿瘤细胞增殖,且人源化前后抗体活性差异不大.2株抗体均与HGF具有较强的结合能力,且可竞争抑制HGF与其受体C-Met的结合.细胞迁移实验显示,2株抗体具有抑制HGF促肿瘤细胞迁移的能力.裸鼠移植瘤试验显示HGF抗体可有效抑制肿瘤的生长,其中HE19-12在试验中显示更好的抗肿瘤活性.小鼠药代结果显示,HE19-12和HD19-27的半衰期分别为423.3 h和342.5 h.结论 成功对制备出的2株人源化单克隆抗体进行初步鉴定及一系列抗肿瘤活性研究,证明具有较强抗肿瘤活性的HGF中和抗体,且具有良好的药代动力学特征,为HGF/C-Met靶点抗肿瘤药物的开发奠定基础.

关键词：HGF、人源化、单克隆抗体、抗肿瘤

所属期刊栏目：33

分类号：R392.11

在线出版日期：2017-06-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：437-442