小鼠抗人PD-1单克隆抗体的制备及其生物学活性评价

摘要：

目的 制备鼠抗人PD-1单克隆抗体,并对其生物阻断活性进行评价.方法 利用重组人源PD-1/PDCD1蛋白作为免疫蛋白,免疫接种Balb/c小鼠,分离并提取小鼠脾淋巴细胞,然后与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0细胞融合培养,经过多次克隆化培养筛选出稳定分泌鼠抗人PD-1单抗的杂交瘤细胞株.鉴定单抗IgG类别及亚类,并分析其特异性和细胞毒性;建立HepG2细胞和Jurkat细胞共同培养体系,ELISA法检测PD-1单抗对Jurkat细胞分泌抗肿瘤细胞因子的影响,MTT法分析PD-1单抗对Jurkat细胞杀伤HepG2细胞能力的影响.结果 获得了1株新的小鼠抗人PD-1单克隆抗体,命名为2H7.单抗2H7能够特异性识别T细胞表面的PD-1蛋白;高浓度长时间处理对Jurkat细胞有一定毒性作用;低浓度单抗2H7可阻断PD-1/PD-L1信号通路,使Jurkat细胞对HepG2细胞杀伤能力显著增强(P＜0.01),且Jurkat细胞分泌的IL-2和IFN-γ等细胞因子水平显著高于对照组(P＜0.01).结论 成功制备了1株具有良好生物阻断活性的小鼠抗人PD-1单克隆抗体2H7,该抗体能够显著提高T细胞对肝癌细胞HepG2的杀伤能力.

关键词：程序性死亡受体1、单克隆抗体、生物学活性

所属期刊栏目：33

分类号：R392.5;R967

资助基金：国家自然科学基金;重庆市基础科学与前沿技术研究重点项目;第三军医大学科技成果转化项目

在线出版日期：2017-05-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：354-359