10.13431/j.cnki.immunol.j.20170002
RNAi沉默CD59对急性T系白血病Jurkat细胞株增殖的影响
目的 运用RNAi慢病毒沉默CD59的表达,观察其对急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞株增殖、凋亡的影响.方法 构建CD59 RNAi-EGFP融合蛋白慢病毒载体,转染急性T系白血病Jurkat细胞株,筛选出稳定转染的细胞系,空病毒组为阴性对照,未处理的Jurkat细胞系作为空白对照;荧光显微镜和流式细胞仪观察各组的细胞转染效率;ELISA检测各组细胞CD59的表达情况;RT-PCR检测各组CD59基因以及凋亡相关基因Bcl-2/Bax mRNA的表达;CCK8表达检测细胞增殖效率的改变;流式细胞术检测各组细胞凋亡情况.结果 荧光显微镜和FCM观察转染效率在90%以上;ELISA结果显示实验组细胞CD59蛋白表达降低;RT-PCR结果显示实验组CD59、Bcl-2 mRNA表达水平降低(P<0.05),Bax mRNA表达水平升高(P<0.05);CCK8结果显示实验组细胞增殖效率明显降低(P<0.05);流式细胞仪结果显示沉默CD59的表达能够促进细胞凋亡(P<0.05).结论 沉默D59基因表达可抑制急性T系白血病Jurkat细胞株的增殖能力并诱导细胞凋亡,为临床急性T系白血病的治疗提供了新靶标、新思路.
RNA干扰、CD59、慢病毒载体、Jurkat细胞系、细胞增殖
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R392.11
国家自然科学基金81273206
2017-03-06(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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