体外扩增的Vγ9Vδ2T细胞抗H1N1流感病毒效应的研究

摘要：

目的 探讨帕米磷酸钠(PAM)体外扩增培养的人外周血Vγ9Vδ2 T细胞对感染流感病毒H1N1的人肺上皮细胞A549的细胞毒效应.方法 PAM和IL-2联合刺激培养健康成人外周血单个核细胞(PBMC)10～ 14 d,免疫磁珠分选法纯化得到Vγ9Vδ2 T细胞,再将Vγ9Vδ2 T细胞与感染流感病毒的A549细胞按不同的效靶比(E∶T)接触共育或按E∶T=201非接触共育6h.流式细胞分析术检测A549的存活率及Vγ9Vδ2 T细胞穿孔素(perforin)的表达情况,收集培养上清检测流感病毒的滴度,提取培养上清及A549细胞的总RNA,实时荧光定量检测流感病毒基质蛋白M1基因的表达情况.结果 PAM在体外能有效活化并扩增Vγ9Vδ2T细胞.Vγ9Vδ2T细胞对感染流感病毒的A549细胞具有较强的杀伤作用,且随E∶T的升高而增大,在E∶T=20∶1时,Vγ9Vδ2 T细胞能杀伤60％的感染了流感病毒的A549细胞.接触共育组的A549细胞杀伤率明显高于非接触共育组(P＜0.05).Vγ9Vδ2 T细胞经流感病毒感染后Perforin的表达明显上调.接触共育组的病毒复制也明显受到抑制(P＜0.05).结论 PAM刺激扩增的Vγ9Vδ2 T细胞能有效杀伤感染流感病毒的人肺上皮细胞A549,其效应机制依赖于两者细胞间的接触.

关键词：Vγ9Vδ2 T细胞、帕米磷酸钠、流感病毒、A549细胞

所属期刊栏目：32

分类号：R392.1

资助基金：国家自然科学基金81471848

在线出版日期：2016-07-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：553-558