鲍曼不动杆菌外膜蛋白A1S_1969的克隆表达及免疫保护机制初步研究

摘要：

目的 制备鲍曼不动杆菌(Ab)A1S_1969重组蛋白,利用小鼠全身脓毒血症感染致死模型评价A1S_1969重组蛋白的免疫保护效果,探讨可能的免疫保护机制,为筛选Ab疫苗有效的保护性抗原奠定基础.方法 基于反向疫苗学技术筛选出Ab外膜蛋白A1S_1969,利用pGEX-6P-2质粒构建GST融合表达载体,重组表达的A1S_1969蛋白经亲和层析高效纯化后与铝佐剂吸附制备而成重组A1S_1969免疫原;采用Balb/c小鼠全身感染模型评价A1S_1969重组蛋白的免疫保护效果,通过ELISA检测免疫小鼠IgG抗体滴度和IgG抗体亚型.制备A1S_1969重组蛋白抗血清进行体外调理吞噬杀菌实验.结果 成功克隆、表达并纯化A1S 1969重组蛋白,纯度＞90％.动物免疫保护结果显示A1S_1969重组蛋白组小鼠存活率为55.6％,对照组小鼠存活率为20.0％(P＜0.05);末次免疫7d后小鼠体内总IgG抗体滴度为1:64 000,以IgG1亚型为主;体外调理吞噬杀菌实验结果显示A1S_1969特异性血清抗体可以增强中性粒细胞对Ab的杀菌作用,实验组杀菌率可达55％,对照组无杀菌活性.结论 A1S_1969重组蛋白可显著提高全身脓毒血症感染致死模型小鼠的存活率,具有良好的免疫保护效果.

关键词：鲍曼不动杆菌、基因工程疫苗、克隆表达、重组蛋白、免疫保护

所属期刊栏目：32

分类号：R378.99(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家重大科技专项2013ZX09J13107-03B

在线出版日期：2016-03-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：104-108