尿酸对人肾小管上皮细胞氧化应激和TGF-β表达的影响

摘要：

目的 观察尿酸对人肾小管上皮细胞氧化应激和TGF-β表达的影响,并探讨其可能作用靶点与机制.方法 体外培养人肾小管上皮HK-2细胞,分别加入不同浓度的尿酸(UA,240、480、720 μmol/L)干预48 h后收集细胞;应用Western blot和免疫荧光化学法对转化生长因子(TGF-β)、抗增殖因子(PHB)蛋白表达进行细胞亚定位及半定量分析.MitoSOX染色检测活细胞线粒体中活性氧(ROS)的产生;分光光度计检测细胞上清液中丙二醛(MDA)含量、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性.结果 Western blot和免疫荧光结果显示,240 μmol/L尿酸干预HK-2细胞48 h,TGF-β、PHB蛋白均较正常组无明显改变,480 μmol/L尿酸干预HK-2细胞,TGF-β表达升高,而PHB较前降低;尿酸浓度为720 μmol/L时,TGF-β上调与PHB下降更加显著.线粒体中ROS的产生量也在480 μmol/L尿酸干预48 h时明显升高,且随尿酸刺激浓度升高继续上调;240μmol/L尿酸刺激细胞48 h,细胞上清中MDA含量、T-SOD活性较正常组无明显差异,480 μmol/L尿酸干预HK-2细胞48 h,MDA含量上升、T-SOD活性降低,尿酸浓度为720 μmol/L时,上述变化更为显著.结论 尿酸可诱导肾小管上皮细胞氧化应激反应,并使TGF-β蛋白表达上调,其机制可能与抑制线粒体相关蛋白PHB表达,使线粒体ROS合成增多有关.

关键词：肾小管上皮细胞、尿酸、抗增殖因子、线粒体、活性氧

所属期刊栏目：30

分类号：R692.6(泌尿科学（泌尿生殖系疾病）)

在线出版日期：2014-08-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：585-589