人巨细胞病毒PP65抗原ELISA检测方法的建立

摘要：

目的 用制备好的兔和大鼠PP65多克隆抗体建立检测人巨细胞病毒PP65抗原的ELISA方法.方法 优化ELISA检测条件,建立检测PP65抗原的标准曲线,确定检测方法的精密度及检出下限.通过对101份临床疑似HCMV感染标本的检测,并与HCMV-IgM(ELISA)以及HCMV-DNA(FQ-PCR)检测结果的比较,分析了该方法的敏感性和特异性.分别检测HSV-1、HSV-2以及EB病毒感染血标本各5份,分析该方法是否非特异结合疱疹病毒科其他病毒抗原.结果 以1∶2 000大鼠pAb包被酶标板,以1∶20 000兔pAb为检测一抗,建立了检测PP65抗原血症的ELISA方法.批间精密度与批内精密度均小于10％,检出下限为5 ng/ml.本方法检测的敏感性和特异性与HCMV-DNA (FQ-PCR)无差别(P＞0.05),但敏感性高于HCMV-IgM (ELISA)方法(P＜0.05).对HSV-1、HSV-2以及EB病毒感染标本的检测结果均为阴性,排除了该方法非特异结合疱疹病毒科其他病毒抗原的可能.结论 建立了检测PP65抗原血症的间接双抗夹心ELISA方法,该方法具有较好的敏感性、特异性、稳定性和重复性.

关键词：人巨细胞病毒、PP65、ELISA、多克隆抗体

所属期刊栏目：30

分类号：R392-33

在线出版日期：2014-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：545-549