东方马脑炎病毒VLPs表达与免疫原性研究

摘要：

目的 表达东方马脑炎病毒(EEEV)病毒样粒子(VLPs),研究其免疫原性.方法 采用PCR方法扩增目的基因,酶切之后连接到供体质粒pFastBacTM1上,构建成重组质粒pFastBacTM1-C-E,然后重组质粒经过基因重组作用与家蚕核型多角体病毒(BmNPV)形成重组病毒BmNPV-C-E,BmNPV-C-E被转染到BmN细胞后以表达VLPs.VLPs鉴定表达正确后,用纯化VLPs与弗氏佐剂乳化成免疫原免疫小鼠,免疫剂量为15μ/只,免疫途径为后肢肌肉注射,免疫2次且间隔时间为14d.2免后第7天检测免疫小鼠外周血中CD4+T细胞/CD8+T细胞比例和细胞因子IL-2、IFN-γ和TNF-α含量,2免后第14天采用ELISA方法检测免疫小鼠血清内抗体IgG效价.结果 研究结果显示实验组小鼠的CD4+T细胞/CD8+T细胞比例和细胞因子IL-2、IFN-γ和TNF-α质量浓度与对照组相比差异均显著(P＜0.01),免疫原实验组和VLPs免疫组2免后的血清效价分别为1∶128与1∶64,而对照组小鼠血清中没有产生IgG抗体.结论 结果表明BmNPV-C-E能在BmN细胞中成功表达EEEV VLPs,并且VLPs能够刺激小鼠产生明显免疫反应,具有较强免疫原性,这为EEEV新型疫苗研究提供了重要参考.

关键词：东方马脑炎病毒、载体构建、病毒样粒子、免疫原性

所属期刊栏目：30

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2014-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：488-492