环境水体中空肠弯曲杆菌荧光定量PCR快速检测方法的研究

摘要：

目的 建立一种环境水体中空肠弯曲杆菌的荧光定量PCR准确快速方法.方法 采用膜吸附-洗脱法浓缩富集环境水体中的空肠弯曲杆菌,根据空肠弯曲杆菌VS1基因序列设计引物,以构建的空肠弯曲杆菌重组质粒作为标准品,建立空肠弯曲杆菌荧光定量PCR检测方法.结果 荧光定量PCR反应体系在2.66× 109～2.66× 100 copies/μl拷贝数模板量的线性范围内,所获得回归方程线性关系较好(R2=0.998),扩增曲线呈S形指数增长；特异性检测中肠炎沙门氏菌等对照菌扩增呈阴性,对于空肠弯曲杆菌纯培养物检测限达到46 cfu/ml,实际水样检测结果与常规生化鉴定结果一致,整个检测过程可以在4h内完成.结论 本研究中建立的空肠弯曲杆菌荧光定量PCR检测方法具有准确、简便、快速等特点,具有较强的实际应用价值,可以用于环境水体中空肠弯曲杆菌的检测.

关键词：环境水体、空肠弯曲杆菌、荧光定量PCR、快速检测

所属期刊栏目：29

分类号：X172(环境生物学)

资助基金：国家质量监督检验检疫总局科研项目200910140-03;中国人民解放军总后勤部基建营房部项目BY111C012

在线出版日期：2013-09-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：685-691