阻断MDR1基因表达逆转结肠癌LoVo/5-Fu敏感性的研究
目的 探讨沉默多药耐药基因MDR1逆转大肠癌耐药细胞株LoVo/5-Fu细胞对5-Fu的耐药性.方法 实验分为3组,转染组(干扰质粒转染人大肠癌耐药细胞株LoVo/5 -Fu细胞)、对照质粒组(转染无关质粒)和未转染对照组.构建靶向MDR1的短发夹RNA (shRNA-MDR1)重组质粒后,转染LoVo/5-Fu细胞,实时荧光定量PCR检测靶细胞MDR1基因表达抑制效果,MTT法检测LoVo/5-Fu细胞对5-Fu的敏感性,流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡情况.平板克隆形成试验检测细胞克隆形成能力,免疫印迹法检测caspase-3及P-gp蛋白表达.结果 与未转染组相比,转染组细胞MDR1 mRNA表达明显下调(P<0.05);细胞对5 -Fu的IC50及RI显著降低(P<0.05),敏感性的相对逆转率为71.2%;细胞克隆形成率明显下降;C1期细胞数增加8.59%,S期的细胞数减少8.9%,G2/M期细胞数减少3.5%;细胞凋亡率增加9.2%(P值均<0.01).caspase-3表达增高,P-gp蛋白降低.结论 shRNAMDR1可抑制大肠癌耐药细胞LoVo/5-Fu中MDR1的表达,从而改善了大肠癌耐药细胞对5-Fu的敏感性.
大肠癌、RNA干扰、基因、多药耐药、细胞凋亡
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R692.4(泌尿科学(泌尿生殖系疾病))
2013-03-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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