CD46RNAi对CD59介导的T细胞信号转导的作用研究

摘要：

目的 构建携带针对CD46基因的pSUPER retro RNAi逆转录病毒载体,研究糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚定蛋白CD59与CD46在介导T细胞信号转导中的相关性.方法 将能转录产生靶向CD46小发夹RNA(shRNA)的寡核苷酸序列,克隆人逆转录病毒载体pSUPER retro,转化大肠杆菌JM109并转染Jurkat细胞.将Jurkat细胞分为未转染的Jurkat细胞组(Ⅰ组)、转染空质粒的Jurkat细胞组(Ⅱ组)、转染CD59干扰质粒的Jurkat细胞组(Ⅲ组)及转染CD46干扰质粒的Jurkat细胞组(Ⅳ组).用RT-PCR、Western blot技术检测各组细胞中的CD59、CD46基因的表达水平.用噻唑蓝(MTT)比色法检测CD46与CD59联合作用对4组Jurkat细胞的增殖效应.结果 重组载体经PCR及限制性内切酶酶切鉴定初步成功后送测序,结果表明序列正确,构建成功,稳定转染后,Ⅳ组细胞CD46分子的表达被成功抑制,Ⅲ组细胞CD59分子的表达被抑制.Ⅰ组和Ⅱ组细胞CD46与CD59单抗联合作用后,增殖能力明显高于Ⅲ组、Ⅳ组(P＜0.05)；但Ⅰ组和Ⅱ组,Ⅲ组和Ⅳ组之间无差异.结论 CD59可增强CD46对T细胞信号转导的效应.

关键词：CD59、CD46、逆转录病毒载体Jurkat细胞、信号转导

所属期刊栏目：28

分类号：R392.11

资助基金：国家自然科学基金3170893

在线出版日期：2012-10-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：576-579