Ara h2三聚体重组蛋白的制备及其低致敏原性鉴定

摘要：

目的 制备花生主要过敏原Ara h 2三聚体重组蛋白并检测其过敏原性.方法 利用分子生物学的方法将3分子的Ara h 2依次串联起来,并将其整合到原核表达载体pET-32a(+),再转化到感受态Origami中;然后利用IPTG诱导其表达;通过Ni2+亲和层析纯化三聚体重组蛋白;Western-blotting和ELISA检测目的蛋白的过敏原性.结果 测序结果表明Trimer成功整合到pET-32a(+)上.三聚体重组蛋白纯化后经SDS-PAGE鉴定,蛋白大小与理论值相符.Western-blotting和ELISA结果表明Trimer与重组的Ara h 2(r-Ara h 2)蛋白相比,结合花生过敏病人混合血清中IgE的能力有所降低.结论 成功制备花生主要过敏原Ara h 2三聚体重组蛋白,初步的体外实验表明该重组蛋白具有低致敏原的潜能.

关键词：花生过敏原、Ara h 2、三聚体、低致敏

所属期刊栏目：27

分类号：R392.11

资助基金：国家自然科学基金;深圳出入境检验检疫局科技项目;深圳大学创新团队基金

在线出版日期：2012-01-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：840-844