pIHsp65GM的构建及其对结核杆菌感染小鼠的保护

摘要：

构建pIHsp65GM双顺反子真核表达质粒,并在真核细胞中表达,研究该基因疫苗的免疫原性及其对小鼠感染结核杆菌后的免疫保护效果.制备基因疫苗,将C57BL/6小鼠于胫前肌注射质粒DNA免疫,末次免疫后用h37rv强毒株经尾静脉攻击小鼠,计数肺和脾组织中结核杆菌的菌落数,对小鼠的部分肺和脾组织作病理切片,经HE染色观察组织病变的程度,测血清特异性IgG,MTT测定脾淋巴细胞特异性增殖指数,测小鼠脾细胞培养上清中IFN-γ的水平,乳酸脱氢酶(LDH)释放法测定免疫小鼠特异性细胞毒性T细胞(CTL)活性.结果pIHsp65GM基因疫苗构建成功并且诱导小鼠特异性IgG的产生、脾淋巴细胞增殖以及IFN-γ的分泌(平均含量显著高于2个阴性对照组(P＜0.001)).pIHsp65GM免疫组小鼠的脾和肺的平均结核菌载量分别低于两个阴性对照组的相应器官的结核菌载量(P＜ 0.001),同时也显著高于BCG免疫对照组.结论成功构建和表达pIHsp65GM质粒,该基因疫苗对小鼠结核杆菌感染有一定的免疫保护效果,能够诱导较强的抗原特异性Th1型细胞免疫应答.

关键词：结核分枝杆菌、热休克蛋白65、人粒细胞-吞噬细胞集落刺激因子、pIHsp65GM质粒、DNA疫苗

所属期刊栏目：27

分类号：R378.91+1;Q939.91(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2011-11-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：666-671