一种大鼠腹腔肥大细胞分离方法
目的 介绍一种密度梯度离心分离大鼠腹腔肥大细胞(RPMC)的技术.方法 比较改良方法和原方法2种分离的细胞量、活性及纯度.台盼蓝染色检测细胞存活率;甲苯胺蓝染色检测肥大细胞纯度.将弃去密度梯度离心上液2 ml(A方法)与2.5 ml(B方法)比较,以分析弃去的细胞液的量与肥大细胞纯度的关系.用C48/80刺激分离的RPMC,检测细胞释放的β-氨基己糖苷酶和组胺以确定分离的RPMC脱颗粒活性;透视电镜扫描观察细胞.结果 改良方法分离的细胞显著多于原方法分离的细胞数;两种方法分离的细胞存活率都在99%以上;肥大细胞纯度都在90%以上.C48/80刺激RPMC,分离的细胞释放大量的β-氨基己糖酶和组胺,高于空白对照组.电镜观察细胞具有明显的肥大细胞形态.结论 改良的Percoll密度梯度离心分离大鼠腹腔肥大细胞的方法可行.
腹腔肥大细胞、Percoll、C48/80β-氨基己糖苷酶、组胺、甲苯胺蓝
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R392-33
广东高校优秀青年创新人才培育项目LYM09049;广州省中医药管理局科研项目20092251
2011-12-13(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
615-618,624