辐照后的AlloMNCs诱导NK细胞体外扩增
目的 探讨照射后的同种异体外周血单个核细胞(allogeneic PB-MNCs,AlloMNCs)对人自然杀伤细胞(NK)体外扩增的影响,为NK细胞的过继免疫治疗奠定基础.方法 Ficoll密度梯度离心法分离健康成人外周血单个核细胞(PBMCs),30、50和70 Gy γ射线照射后的AlloMNCs作为饲养细胞,分别加入上述PBMCs,在添加细胞因子的X-VTVO15TM无血清培养基中进行培养扩增,同时选择未添加饲养细胞的作为对照组;台盼蓝拒染法进行活细胞计数;流式细胞术检测CD56+CD3-NK细胞纯度;MTT法检测细胞杀伤活性.结果 加入饲养细胞的PBMCs在添加了细胞因子的X-VIVO15TM无血清培养基中可培养21d,30 Gy照射后的AlloMNCs作为饲养细胞时细胞扩增最明显,在第21天时扩增了270.3±10.4倍,CD56+CD3-NK细胞纯度由培养前的(9.7+2.4)%提高到扩增后的(56.5±7.8)%,与无饲养细胞的对照组相比较,差异均有统计学意义(P<0.05).细胞杀伤实验表明,当效靶比为10:1时,添加30Gy照射后的AlloMNCs刺激扩增的NK细胞对K562和H08910的杀伤率平均达到59.7%、63.2%,分别与对照组的28.3%、32.2%相比较,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 30 Gy照射后的AlloMNCs可作为饲养细胞在体外促进NK细胞的增殖,为NK细胞的肿瘤过继免疫治疗提供了一种简单有效的扩增NK细胞的方法.
自然杀伤细胞、扩增、饲养细胞、照射后的AlloMNCs、免疫治疗
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R392-33
安徽省科技攻关课题08010302101
2011-04-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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