上调hHGF促进人骨髓间充质干细胞向肝样细胞分化
目的 探讨人促肝细胞生长因子(hHGF)对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)向肝样细胞分化的影响.方法 克隆hHGF基因,构建携带hHGF基因的真核表达质粒(pcDNA3.1(+)-hHGF),用脂质体法将pcDNA3.1(+)-hHGF转染hBMSCs,分别通过激光共聚焦、反转录聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫蛋白印迹(Western blot)检测hBMSCs中表达hHGF的水平;用酒精性肝硬化患者血清诱导hHGF上调后的hBMSCs,采用Western blot分别检测诱导细胞内甲胎蛋白(AFP)及白蛋白(ALB)的表达变化.结果 成功构建pcDNA3.1(+)-hHGF表达质粒;激光共聚焦、RT-PCR、Western blot结果均表明转染后hBMSCs中hHGF分子呈高表达.Western blot结果发现诱导7 d,14 d转染后hBMSCs中AFP、ALB表达明显高于对照组.结论 转染pcDNA3.1(+)-hHGF可以明显上调hHGF在hBMSCs中的表达;hBMSCs高表达hHGF后,经酒精性肝硬化血清诱导可明显促进其向肝样细胞分化,为基因治疗终末期肝病提供了一种新方法.
人骨髓间充质干细胞、人促肝细胞生长因子、肝样细胞、甲胎蛋白、白蛋白
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R392.12
2011-04-12(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
37-41,48