ERK干扰质粒的构建及对胃癌细胞株BGC823DcR3表达的影响
目的 探讨胃癌发展的分子机制,通过构建ERK1/2 shRNA真核表达载体,体外研究其对人胃癌细胞株BGC823ERK1/2蛋白及DcR3表达水平的影响.方法 应用PRNAT-U6.1/Neo载体构建ERK1/2基因shRNA重组质粒,经脂质体法导人BGC823细胞中,分别设置对照组、干扰组和U0126抑制剂组.Westem blot法检测转染后BGC823细胞及抑制剂使用后ERK1/2蛋白的表达变化,荧光显微镜检测质粒自带GFP基因的表达情况确认转染效率,ELISA法检测各组细胞上清中DcR3分泌蛋白的表达特点.结果 成功构建ERK1/2基因shRNA重组质粒.证明了ERK1/2蛋白的表达与DcR3的分泌水平在BGC823细胞株中呈正相关.结论 ERK1/2干扰质粒明显降低BGC823细胞的ERK1/2蛋白表达水平,ERK信号通路对DcR3的分泌具有重要调控作用,为其下游调控机制的研究奠定了基础.
ERK1/2基因、DcR3、RNA干扰、胃癌
26
R392.3
厦门市科技计划项目3502Z20083008
2011-03-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
1039-1042,1047
