不同培养基条件来源空肠弯曲菌外膜蛋白纯化及其表达差异

摘要：

目的 探讨不同培养基培养条件下空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni,CJ)M.28 000～31 000外膜蛋白的纯化方案及表达差异.方法 分别采用改良布氏血琼脂培养基(以下简称Bull's)、改良卵黄培养基(以下简称Yolk)培养CJ,比较两者的生长特征.制备CJ全菌抗血清.0.2 mol/L、pH2.2甘氨酸-HCl缓冲液抽取CJ外膜蛋白,Sephadex G-75层析法纯化其中的Mr28 000-31 000蛋白.SDS-PAGE技术检测Mr 28 000～31 000外膜蛋白表达情况和含量差异,Western-blotting检测该类蛋白的抗原性.结果 卵黄培养基培养的细菌生长更典型,Sephadex G-75层析能够稳定可靠地纯化CJ细菌肘Mr28 000～31 000外膜蛋白,卵黄培养基培养来源的CJ的Mr 28 000～31 000表达量占酸提取物的70%,大于改良布氏血琼脂培养基培养来源的表达量48%,两种培养基来源的CJ的Mr 28 000～31 000蛋白成分均与CJ全菌兔抗血清发生免疫反应.结论 不同培养基来源CJ的Mr 28 000～31 000外膜蛋白均能被SphadexG-75分子筛纯化.该类蛋白能够在改良卵黄培养基上更高效表达,不同培养基来源的该类蛋白均具有良好的抗原性,该培养基的使用和该类蛋白有效提取为CJ感染的血清学特异性诊断及疫苗的研制奠定基础.

关键词：空肠弯曲菌、培养基、外膜蛋白、SephadexG-75、纯化

所属期刊栏目：26

分类号：R392.11

资助基金：广东医学院青年基金;湛江市科技攻关计划

在线出版日期：2010-11-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：615-619