鸡蛋主要过敏原Gal d1片段基因的克隆、表达、纯化及免疫学鉴定

摘要：

目的 克隆、表达和纯化鸡蛋主要过敏原Gal d1区基因,并对其免疫学活性进行鉴定.方法 用生物信息学方法对鸡蛋主要过敏原Gal d1基因进行抗原表位预测,设计特异性引物,用PCR的方法分别扩增Gal d1 N端和C端基因,将其分别连接到原核表达载体PET32a上.重组质粒转入大肠杆菌,用IPTG诱导表达,通过镍亲和柱层析法纯化重组蛋白,最后用Westernblotting检测重组蛋白的免疫原性.结果 表达的蛋白均以可溶性为主,N端融合蛋白相对分子质量为28 600,C端融合蛋白相对分子质量为26 800,纯化的N端和C端蛋白均有较好的免疫原性,C端的免疫原性强于N端.结论 成功地克隆和表达了鸡蛋主要变应原基因Gal d1的N端和C端,为鸡蛋过敏的诊断和免疫治疗奠定了基础.

关键词：鸡蛋过敏原、Gal d1、克隆、表达

所属期刊栏目：26

分类号：R392.11

资助基金：深圳市科技计划JC200903130238A

在线出版日期：2010-11-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：589-593