抗人DR5单链抗体诱导HepG2细胞凋亡的实验研究
目的 探究抗人DR5单链抗体(scFv)ZF1对肝癌细胞株HepG-2的凋亡作用及机制.方法 MTT法检测ZF1对HeDG-2的细胞毒效应;流式细胞术检测ZF1诱导HepG2的凋亡率;荧光显微镜观察经ANNEXIN-V/PI双染的HepG-2细胞;DNA Ladder检测HeDG-2细胞的DNA特点;Western blotting检测Bcl-2、PARP蛋白的表达.结果 MTT结果显示ZF1抑制HepG-2细胞生长呈剂苗依赖性,ZF1终浓度分别为0.225、0.45、0.9 mg/ml、1.2 mg/ml 200 μl时,HepG-2细胞的生长抑制率分别为28.8%、52.3%、65.3%、89.8%;流式细胞仪检测结果显示,终浓度分别为0.225、0.45、1.2 mg/ml 2 ml作用HepG-2细胞4 h,凋亡率分别为32.9%、56%、83.2%;荧光显微镜下可见早期凋亡细胞,细胞膜呈绿色荧光,细胞内有凋亡小体的形成,伴有核结构的变化;DNA Ladder出现明显的慧星尾状条带;Western blotting检测到ZF1诱导凋亡的细胞内Bcl-2、PARP蛋白表达上调.结论 ZF1可诱导HeDG2细胞株凋亡,这种作用与HepG2细胞株表达Bcl-2、PARP蛋白蛋白表达上调相关.
DR5、单链抗体、HepG2细胞株、凋亡
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R392.11
福建省自然科学基金资助项目C0710046;国家级大学生创新实验项目基金0070-2X11A1
2010-11-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
585-588,593