功能性重组人巨噬细胞移动抑制因子(hMIF)的制备及鉴定

摘要：

目的 制备具有生物学活性的重组人巨噬细胞移动抑制因子(hMIF),为进一步研究MIF的功能和筛选MIF阻断剂奠定基础.方法 构建PET11b-MIF、PET32a-MIF表达载体,建立重组MIF纯化方案,通过体内、体外实验对不同表达方式的重组hMIF互变异构酶活性、促进炎症因子释放,加重脓毒症动物死亡率的作用进行对比研究.结果 成功表达了两种重组hMIF,建立并优化了重组MIF的纯化方法,发现PET11b-MIF表达的的MIF经SP Sepharose FF阳离子交换层析和Hitrap 26/60sephacryl S-300分子筛纯化后具有明显的互变异构酶的活性,能剂量依赖性地刺激RAW264.7细胞释放NO和TNF-α、IL-6,并加重了脓毒症动物的死亡率.而PET32a-MIF表达的N端带有Trx标签的hMIF(Tr-hMIF)无上述作用.结论 我们成功制备了具有生物学活性的MIF,为深入研究MIF的功能和筛选MIF阻断剂奠定了基础.

关键词：巨噬细胞移动因子、脓毒症、互变异构酶活性、阻断剂

所属期刊栏目：26

分类号：R392.11

资助基金：863项目2006AA02A247

在线出版日期：2010-06-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：290-293,298