人CL-L1基因片段的原核表达、纯化及多克隆抗体的制备

摘要：

目的 获取重组人CL-L1颈区.糖识别区纯化蛋白,制备多克隆抗体.方法 采用PCR方法扩增人CL-L1颈区.糖识别区目的 基因片段,构建原核表达载体,进行原核表达与蛋白纯化,然后免疫家兔,制备多克隆抗体.采用EIJSA检测抗体效价,免疫印迹法检测蛋白纯度和抗体的特异性.结果 成功构建了人CL-L1颈区.糖识别区原核表达载体pRSET-C/NECK-CRD△K,在E.coli BL21中表达,镍亲和层析柱纯化,得到相对分子质最19 200的融合蛋白,免疫家兔后收获抗血清,ELISA显示抗体效价为1/20 000,具有高度特异性,免疫印迹结果显示制备的多抗可以与重组人CL-L1颈区一糖识别区蛋白特异性结合.结论 本研究获得了人CL-L1颈区.糖识别区纯化蛋白,制备了人CL-L1颈区.糖识别区多克隆抗体,为cL厂L1的结构、组织表达谱和功能的研究奠定了基础.

关键词：人肝脏胶原样凝集素l、原核表达、蛋白质纯化、抗体制备

所属期刊栏目：25

分类号：R392.11

资助基金：河南省基础与前沿研究项目072300450300

在线出版日期：2009-04-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：108-110