HPV16,18,58-mE67重组腺病毒的构建及克隆表达

摘要：

目的 构建能同时表达HPV16,18,58三亚型E6-E7优化融合基因的重组腺病毒,为下一步获得适合国情的宫颈癌HPV三价治疗性候选疫苗打基础.方法 常规扩增、构建HPV16,18,58的E6-E7融合基因,PCR定点突变消除其转化活性后以IRES相连并重组入pAdeno-X腺病毒载体系统;体外细胞、软琼脂培养及裸鼠成瘤实验检测突变基因转化活性去除情况;重组腺病毒电击转染293包装细胞,Western blot分析外源基因表达情况.结果 三型重组融合基因序列与设计完全一致,其中突变基因的转化活性显著降低,Western blot等显示所构建重组腺病毒在293细胞中高效表达外源基因.结论 成功构建表达HPV16,18,58三型E6-E7融合基因的重组腺病毒,并有效消除了其转化活性,为下一步疫苗研发打下了基础.

关键词：人乳头瘤病毒、腺病毒、转化活性

所属期刊栏目：24

分类号：R394.6;R392.11

资助基金：深圳市重点实验室提升计划资助项目

在线出版日期：2008-08-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：459-463