鼠A20基因的腺病毒载体构建及耳蜗毛细胞表达

摘要：

目的 构建鼠锌指蛋白A20基因的重组腺病毒载体,并观察其对豚鼠耳蜗毛细胞的感染情况.方法 采用基因工程技术,经亚克隆后将A20基因片段克隆至穿梭质粒pAdTrack-CMV上,利用pAdEasy系统进行细菌内同源重组后,脂质体转染HEK293细胞包装、扩增,将重组腺病毒感染耳蜗毛细胞.PCR方法对重组体腺病毒进行鉴定,利用穿梭质粒中带有绿色荧光蛋白GFP报告基因对病毒滴度和感染情况进行监测.结果 酶切鉴定及PCR结果表明A20基因重组腺病毒载体构建成功,病毒滴度达5×109pfu/mL,并对耳蜗毛细胞有很强的感染能力.结论 应用细菌内同源重组法成功构建了含鼠A20基因的重组腺病毒载体.

关键词：腺病毒、A20基因、同源重组

所属期刊栏目：24

分类号：Q343;Q344.1;Q939.4;R-332(遗传学分支学科)

资助基金：重庆市自然科学基金

在线出版日期：2008-06-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：337-339,345