小鼠HAX-1基因重组腺病毒载体的构建表达和鉴定

摘要：

目的 构建小鼠Hax-1基因的重组腺病毒载体,以期进一步进行系统性红斑狼疮模型BXSB小鼠的体内实验研究.方法 用RT-PCR方法扩增小鼠全长Hax-1基因,经T/A克隆后,亚克隆至穿梭质粒pAdtrack-CMV上,在BJ5183细菌中和AdEasy-1进行同源重组,筛选阳性克隆,酶切、测序鉴定正确后,脂质体法转染AD-293细胞进行包装,扩增,氯化铯密度梯度离心纯化病毒并检测其滴度.RT-PCR鉴定重组腺病毒转染AD-293细胞后Hax-1的表达,同时进行野生型腺病毒的检测.结果 经酶切及测序证实Hax-1基因重组腺病毒载体构建成功.PCR检测转染后AD-293细胞内Hax-1基因水平的表达,且无野生型腺病毒的产生.结论 成功构建了含小鼠Hax-1基因的重组腺病毒载体,为探讨Hax-1的生物学功能奠定了基础.

关键词：Hax-1、腺病毒、细胞凋亡

所属期刊栏目：22

分类号：R392

资助基金：国家自然科学基金30671886

在线出版日期：2006-12-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：694-697