色素上皮细胞衍生因子表达载体的构建

摘要：

目的构建色素上皮细胞衍生因子(PEDF)的表达载体.方法从孕8周的胚胎绒毛中提取总RNA,经RT-PCR扩增,获得编码人PEDF的全基因序列,采用T-A克隆法,将PEDF基因克隆入PMD18-T中间载体并转化入大肠杆菌E.coliJM109中,提取重组质粒并酶切鉴定,将鉴定正确的质粒命名为PMD18-T/PEDF,DNA测序,测序正确后构建重组表达载体pET28a/PEDF,转化大肠杆菌E.coli DH5α并酶切鉴定.结果重组表达载体pET28a/PEDF在大肠杆菌E.coli DH5α中克隆表达.结论构建了PEDF重组表达载体pET28a/PEDF,为重组PEDF的进一步表达及纯化奠定了基础.

关键词：色素上皮细胞衍生因子、克隆、表达、载体

所属期刊栏目：22

分类号：Q785(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2006-03-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：98-100,103