GST Pull-down实验鉴定NF-κB相互作用多肽

摘要：

目的体外鉴定NF-κB相互作用多肽与p50和p65间的相互作用.方法首先构建GST-作用多肽融合蛋白的原核表达载体pET-42a/polypeptide及NF-κB50和p65亚基保守结构域的原核表达载体pET22b/p50和pET22b/p65,并在大肠杆菌E.coli BL-21中诱导表达,后进行GST pull-down实验验证多肽与NF-κBp50和p65的结合效应.结果经诱导表达获得了可溶性的GST-多肽融合蛋白和具有DNA结合活性的p50、p65蛋白,GST pull-down实验证实3条多肽与p50发生特异地相互作用.结论证实3条多肽在体外能与p50发生物理性的相互作用,这为获得靶向NF-κB的功能拮抗多肽工作奠定了基础.

关键词：GST Pull-down实验、多肽、NF-κB p50/p65、蛋白间相互作用

所属期刊栏目：22

分类号：Q503;Q51;Q58(一般性问题)

资助基金：法国国家自然科学基金G1999054203;中国科学院资助项目300800009;30200270;军队基金

在线出版日期：2006-03-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：94-97