疏水层析法和凝胶过滤法分离HI47抗CD20 F(ab')2之比较

摘要：

目的比较疏水层析和凝胶过滤两种方法分离纯化HI47抗CD20 F(ab')2的优缺点.方法采用亲和层析柱protein-G对发酵菌体裂解液进行粗纯化,分别采用疏水层析法和凝胶过滤法进行抗CD20 F(ab')2的分离纯化:疏水层析采用梯度洗脱,80%B液洗脱20min,100%B液洗脱30 min;凝胶过滤以50mmol/L PB缓冲液(pH 7.0),0.8 mL/min洗脱4 h.结果粗纯化产物主要含F(ab')2、Fab',含量分别为19.6%、59.7%.采用疏水层析法1 h即可完成分离,F(ab')2回收率为67%,纯度为89.3%;凝胶过滤4 h完成分离,F(ab')2回收率为65%,纯度为90.5%.FACS结果表明,两者结合Raji细胞的阳性率分别为99.93%和99.97%.结论疏水层析分离纯化抗CD20 F(ab')2简单、快速、回收率高、纯度高,适用于大规模的工业化生产.

关键词：疏水层析、凝胶过滤、F(ab’)2

所属期刊栏目：21

分类号：R392.11

资助基金：国家科技攻关项目2000141、20001AA215341

在线出版日期：2005-05-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：142-144,147