人重组pMAGE-A1/EGFP真核表达质粒的构建与表达

摘要：

目的特异克隆MAGE-A1开放读码框基因,构建以绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因的包含MAGE-A1的真核表达载体并转染人PBMC来源DC细胞.方法根据MAGE-A1特征序列设计PCR扩增引物,从Mel-526中扩增MAGE-A1基因开放读码框,并克隆至pIRES-EGFP中,构建人重组pMAGE-Al/EGFP真核表达质粒.利用电转染方法将该重组质粒转入人外周血来源DC细胞并检测MAGE-A1和EGFP的表达情况.结果成功构建真核表达质粒pMAGE-A1/EGFP,转染人PBMC来源DC细胞并检测到MAGE-A1和EGFP表达,两者表达率分别为(8.8±0.9)%和(8.47±0.78)%,无统计学差异.结论成功构建人重组真核表达质粒pMAGE-A1/EGFP,为开展MAGE-A1为基础的免疫治疗提供有利的分子生物学工具.

关键词：MAGE-A1基因、绿色荧光蛋白、基因克隆、真核表达质粒

所属期刊栏目：21

分类号：R730.51(肿瘤学)

在线出版日期：2005-05-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：107-110