结核杆菌Ag85B与ESAT-6双顺反子真核表达质粒的构建及体外表达

摘要：

目的构建结核杆菌Ag85B与ESAT-6双顺反子真核表达质粒.方法采用PCR的方法从结核杆菌H37Rv基因组DNA中扩增出Ag85B及ESAT-6基因,将其分别定向克隆入真核双表达载体pIRES,构建同时表达两个目的基因的双顺反子重组质粒.进行酶切分析及序列测定后,用脂质体包裹体外转染A549细胞,RT-PCR检测Ag85B及ESAT-6的表达.结果核酸序列测定证实重组质粒构建正确;该重组质粒能在体外表达Ag85B及ESAT-6 mRNA.结论成功构建了结核杆菌Ag85B及ESAT-6双顺反子真核表达质粒,并在体外实现了共表达,为进一步在整体动物水平的实验研究奠定了基础.

关键词：结核杆菌、Ag85B、ESAT-6、双顺反子

所属期刊栏目：21

分类号：R378.91(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：湖北省科技攻关项目2003AA3031304

在线出版日期：2005-03-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：33-36