10.3969/j.issn.1000-8861.2004.02.009
复合干扰素在毕赤酵母中的分泌表达、纯化及活性分析
目的在毕赤酵母中高效分泌表达复合干扰素.方法根据毕赤酵母密码子偏性合成了复合干扰素基因,克隆至分泌型酵母表达载体pMEX9K,线性化后转化毕赤酵母GS115,筛选高表达菌株.诱导后的培养上清经过离子交换,疏水层析,凝胶过滤三步层析纯化,用细胞病变抑制法测定其活性,并结合lowry法蛋白定量计算其比活性.结果SDS-PAGE分析显示,重组蛋白以可溶性分子的形式存在于上清液中,经纯化后纯度达到96%,其N端氨基酸序列与理论值一致,比活与干复津相当.结论复合干扰素在毕赤酵母中获得高效分泌表达,为获得大量基因工程产品奠定了基础.
复合干扰素、毕赤酵母、基因表达
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Q291;Q786
2004-06-04(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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