人Toll-like receptor 2胞外段的克隆和表达

摘要：

目的克隆、表达人Toll-like receptor 2(TLR2)胞外段(A26-T588)基因,获得人TLR2胞外段蛋白.方法RT-PCR扩增TLR2胞外段基因,以pcDNA3.1+质粒为载体在HEK293细胞中表达TLR2胞外段蛋白,同时以pcDNA3.1+/TLR2(A26-T588)重组质粒免疫昆明鼠,制备抗TLR2胞外段蛋白多抗.结果PCR扩增及重组质粒测序结果表明成功地构建了pcDNA3.1+/TLR2(A26-T588)真核表达质粒,SDS-PAGE分析纯化产物在Mr为68 000处出现明显蛋白条带.重组质粒DNA免疫小鼠3次后,血清抗体滴度可达1:250.TLR2胞外段蛋白可与LPS结合,并在一定的质量浓度范围内呈剂量依赖性.结论构建的pcDNA3.1+/TLR2(A26-T588)真核表达质粒可在哺乳动物细胞中表达TLR2胞外段蛋白,并与重组质粒DNA免疫小鼠抗血清及TLR2单克隆抗体TL2.1特异性反应,由此证明其表达正确.

关键词：Toll-like receptor 2、胞外段蛋白、多克隆抗体

所属期刊栏目：19

分类号：R392

资助基金：国家自然科学基金30070719

在线出版日期：2004-01-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：332-335