10.3969/j.issn.1000-8861.2002.06.006
可溶性嵌合补体抑制分子的构建及表达
目的制备能抑制补体活化的2个关键环节(C3/C5转化酶和MAC的形成)的一种新型、高效补体抑制剂.方法先设计引物,然后通过PCR技术扩增重组可溶性CD46/CD55/CD59嵌合分子cDNA片段,重组于pSecTagA真核表达载体上,分别利用COS-7细胞和中国仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary,CHO)细胞进行表达,并用抗人CD46多克隆抗体及抗人CD55、CD59单克隆抗体对表达产物进行westem blotting鉴定.结果 DNA测序证实,前端带有小鼠IgGk链前导序列,后端融合有编码6个组氨酸碱基的CD46/CD55/CD59嵌合分子cDNA片段的阅读框完整.免疫印迹结果显示,表达的重组蛋白分别能与抗入CD46多克隆抗体和抗人CD55、CD59单克隆抗体结合.结论成功构建并在真核细胞内表达了重组可溶性CD46/CD55/CD59嵌合分子,为进一步研制和开发新一代多功能、多靶点补体抑制剂奠定了基础.
CD46/CD55/CD59、PCR、嵌合分子、免疫印迹
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R392.4
中关村新药研究基金
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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