亚洲棉7号染色体分离及文库构建

摘要：

采用前低渗、酶解、后低渗和盖片轻压相结合的方法,建立了激光法分离二倍体亚洲棉石系亚1号单条染色体技术.单染色体经去蛋白、酶切和PCR扩增后,产物以Southern杂交、简单重复序列(Simple sequence repeats,SSR)引物扩增和荧光原位杂交技术(Fluorescence in situ hybridization,FISH)进行验证,构建了棉花单条染色体文库.克隆片段长度在150～1000 bp,平均为550 bp;文库包含1.38×105个克隆,覆盖染色体长度1倍左右,空载率为1％,滴度为1.3×106 pfu· mL-1,单一拷贝和低拷贝比例达到59％以上,为该条染色体分子标记的筛选、重要基因克隆和定位、遗传图谱的饱和奠定基础.

关键词：亚洲棉、显微切割、微克隆

所属期刊栏目：24

分类号：S562.035(经济作物)

资助基金：国家转基因生物新品种培育重大专项2008ZX08005-003;国家自然科学基金31071466

在线出版日期：2013-01-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：379-385