石鲽外周血细胞的培养及染色体制备条件的探讨

摘要：

以石鲽(Kareius bicoloratus)为试验材料研究探讨其外周血细胞培养及染色体制备的条件方法.用RPMI 1640全血培养基进行培养,从血液保存时间、刺激源PHA(植物血球凝集素)和ConA(刀豆蛋白A)等方面对外周血淋巴细胞的培养及其染色体制备条件进行探讨,建立较成熟的石鲽外周血淋巴细胞培养及染色体制备的方法.结果表明: 血液于4℃保存3d后用全血培养基进行培养,细胞仍可正常生长;在 16℃培养温度下, ConA和PHA两种刺激源均能促进石鲽外周血淋巴细胞的分裂增殖,培养时间以 72h最好;从培养的血细胞形态和白细胞数目来看,以ConA为刺激源的作用效果好于以PHA为刺激源的作用效果;5ml培养基中加入0.2ml全血,16℃下用终浓度为0.1mg/ml的ConA为刺激源培养72h,在结束培养前4h加入终浓度0.6μg/ml秋水仙素,0.075mol/L的氯化钾低渗35min可获得较好的染色体分裂相.

关键词：石鲽、外周血细胞培养、染色体制片

所属期刊栏目：26

分类号：S968.1(水产养殖技术)

在线出版日期：2010-03-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：325-329