10.3969/j.issn.1001-1498.2016.04.015
红椿 SSR-PCR 体系建立和多态性引物筛选
[目的]本研究旨在建立红椿 SSR-PCR 最佳反应体系,并筛选适于红椿 SSR 分析的高多态性引物。[方法]通过 L16(45)正交试验设计,确立红椿 SSR-PCR 最佳反应体系;利用优化后的体系对来自楝科植物的135对 SSR 引物,在6个不同的红椿居群中进行扩增,筛出能有效扩增的引物并进一步筛选出适于红椿的高多态性引物。[结果](1)10μL 基于荧光 dUTP 的 SSR-PCR 体系中包含:10×buffer 1.0μL,Taq 酶(5 U·μL -1)0.1μL,MgCl2(25 mmol·L -1)0.8μL,dNTP (200 mmol·L -1)0.025μL,荧光 dUTP(1 nmol·μL -1)0.01μL,引物(10 mmol·L -1) 0.8μL,DNA 模板45 ng 剩余用 ddH2 O 补足;(2)筛选出29对能有效扩增的引物,复选后获得了12对适于红椿 SSR分析的高多态性引物。[结论]建立了 SSR-PCR 最佳反应体系并筛选出高多态性引物,为红椿的分子标记等遗传学研究提供了基础。
SSR、红椿、体系优化、引物筛选
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S792.99(森林树种)
国家林业局公益性行业专项201004020。
2016-08-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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