10.3969/j.issn.1001-1498.2016.02.011
利用 PMI 选择标记进行杨树转基因体系的研究
[目的]利用不同于抗生素的 PMI 为选择标记基因的遗传转化体系,对杨树进行双抗虫基因(Bt 和 CpTI)的转基因研究。建立杨树以 PMI 为安全标记基因的转基因体系,为安全、高效的林木转基因育种研究提供实验依据。[方法]选择已有的转 CpTI 抗虫基因(利用 Kmr 选择标记获得)的美洲黑杨杂种优良无性系南林895杨(Populus × euramericana ‘Nanlin895’)为受体材料,对杨树叶片、叶片分化芽、茎段生根的甘露糖敏感性等筛选优化,采用农杆菌介导的方法进行双抗虫基因的研究。[结果]较为适合的杨树叶片筛选培养基为:甘露糖8 g·L -1和蔗糖22 g· L -1;叶片分化芽筛选培养基为:甘露糖10 g·L -1和蔗糖20 g·L -1;茎段生根筛选培养基:甘露糖8 g·L -1和蔗糖22 g·L -1。在此基础上,获得了转 Bt 和 CpTI 双抗虫基因的植株8株。[结论]初步建立了以 PMI 为安全标记基因的杨树转基因体系:确定了 PMI 筛选的最适选择压,成功构建了含 PMI 选择标记基因的植物抗虫表达载体,通过农杆菌介导的遗传转化最终获得了转双抗虫基因植株。
PMI、选择标记、南林 895 杨、转基因体系、抗虫
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S792.119(森林树种)
国家科技部“863计划”课题2013AA102703;国家国际科技合作专项2014DFG32440;江苏高校优势学科建设工程项目
2016-05-25(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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