荔波连蕊茶GA2ox1基因的克隆及表达分析

摘要：

[目的] GA2氧化酶是赤霉素生物合成代谢过程中关键酶之一,GA2ox家族基因常被用于植物矮化基因工程育种.[方法]根据植物GA2氧化酶基因编码区的保守序列设计引物,以山茶属荔波连蕊茶嫩枝为材料,提取总RNA,进行RT-PCR.采用RACE技术扩增获得1 371 bp的GA2ox基因全长cDNA序列,命名为ClGA2ox1(GenBank 登录号KJ502290).[结果]序列分析表明,ClGA2ox1放阅读框(ORF)为1 002 bp,编码333个氨基酸,5'非编码区59 bp,3'非编码区310 bp.预测的蛋白质分子量为37.31 kD,等电点为5.92,具有GA2ox超基因家族的保守结构域和特有的氨基酸残基.ClGA2ox1蛋白与GenBank中收录的其它植物GA2ox蛋白氨基酸的相似性达到80％.构建系统进化树,结果显示山茶GA2氧化酶与烟草GA2ox蛋白的亲缘关系最为密切.实时定量PCR结果显示,该基因在荔波边蕊茶不同器官及发育不同时期的均有表达,表达量有所不同:ClGA2ox1基因在2年生茎段中的表达量最高,在嫩枝和根中也有较高的表达,而在新抽生的嫩叶中最低.[结论]试验结果为进一步明确ClGA2ox1基因的功能特征及揭示其参与调控植物生长的分子机制奠定基础.

关键词：荔波连蕊茶、GA2氧化酶、实时荧光定量PCR、克隆

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分类号：S718.46(林业基础科学)

资助基金：“十二五”国家科技支撑计划课题2012BA01B0703;国家国际科技合作项目2011DFA30490;浙江省花卉新品种选育重大科技专项2012C12909-6;浙江省省院合作林业科技项目2012SY02

在线出版日期：2016-11-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：41-47