绿竹BoGPIAP基因克隆与异位表达研究

摘要：

糖基化磷脂酰肌醇锚定蛋白(GPIAP)因其结构和功能的多样性,决定了它在各种生物学过程中都发挥着重要作用.采用同源克隆的方法从绿竹(Bambusa oldhamii)中获得一个GPIAP同源基因,命名为BoGPIAP,cDNA全长1 772 bp,其中包括1 356 bp的开放阅读框,编码一个451 aa的的蛋白.蛋白结构分析表明,该蛋白包含1个典型的GPIAP家族保守区域(47-211)和1个CCVS结构域,在N-端和C-端分别具有1个跨膜信号肽和1个GPI锚定信号肽,属于GPIAP家族.构建BoGPIAP与GFP融合的表达载体,在洋葱表皮细胞中瞬时表达,结果显示BoCOBL::GFP融合蛋白定位于细胞膜上,证明BoGPIAP基因编码的蛋白为膜蛋白.分别构建BoGPIAP的正义、反义表达载体并转化烟草(Nicotiana tabacum).PCR检测结果表明,BoGPIAP已转入烟草.与野生型相比,转反义基因植株细弱,纤维细胞壁明显变薄;而转正义基因植株粗壮,纤维细胞壁明显变厚.表明BoGPIAP可能对竹子纤维细胞壁的发育具有调控作用.

关键词：绿竹、糖基化磷脂酰肌醇锚定蛋白基因、亚细胞定位、异位表达、纤维细胞

所属期刊栏目：28

分类号：S795.5(森林树种)

资助基金：国家科技支撑计划专题“分子辅助育种技术集成与示范”2012BAD23B0504;“竹藤优异种质创制创新与种苗培育标准化示范”2015BAD04B01

在线出版日期：2015-11-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：627-633