构树ISSR反应体系的优化与建立

摘要：

利用正交试验对Taq酶浓度、引物浓度、dNTPs浓度、Mg2+浓度和模板DNA浓度5个因素进行优化,从而建立了一套适宜构树的ISSR-PCR反应体系.在20 μL的反应体系中,各反应物的最适宜含量为:0.07 U·μL-1 TaqDNA聚合酶、0.35 μmol·L-1ISSR引物、0.3 mmol·L-dNTPs,2.0 mmol·L-Mg2+、1.2 ng· μL-1模板DNA.PCR扩增程序为:94℃预变性5min,94℃变性30 s,46℃退火45 s,72℃延伸2 min,40个循环.

关键词：构树、ISSR、PCR反应体系、正交试验优化

所属期刊栏目：26

分类号：S718.46(林业基础科学)

资助基金：国家自然科学基金"西南干热河谷野生构树种质评价与分子鉴定研究30972383";中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金RIRICAF201007M

在线出版日期：2013-04-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：76-80